ERβ ЭКСПРЕССИЯСЫ AKT/MTOR ЖОЛЫ АРҚЫЛЫ ІРІ ҚАРА АНАЛЫҚ БЕЗ ГРАНУЛОЗА ЖАСУШАСЫНЫҢ АУТОФАГИЯСЫН ИНДУКЦИЯЛАЙДЫ.

Аңдатпа

Зерттеуіміздің мақсаты - эстрогеннің β рецепторының (ERβ) төмендеуі немесе жоғары экспрессиясының сиыр овариінің гранулярлық жасушаларының пролиферациясына, стероидогенезіне, аутофагиясына және сигналдық жолдарына әсерін зерттеу болды. Зерттеуде сиыр овариінің гранулярлық жасушалары (СОГЖ) in vitro жағдайда өсіріліп, ERβ-ге қарсы siRNA (si-ERβ) немесе ERβ-нің жоғары экспрессиясын тудыратын плазмидалармен (oe-ERβ) трансфекцияланды. Жасушалардың пролиферациясын анықтау үшін CCK-8 жинағы қолданылды. Ген транскрипциясының деңгейін анықтау үшін сандық нақты уақыттағы ПТР қолданылды. Белоктардың экспрессиясын вестерн-блот әдісімен бағалады, ал стероид гормондарының өндірісін арнайы жинақпен өлшеді. Нәтижелер ERβ экспрессиясының деңгейі гранулярлық жасушалардың пролиферациясына әсер ететінін көрсетті, бұл FSHR, CYP19A1, HSD3β1 және STAR гендерінің транскрипция деңгейінің өзгерістерімен, сондай-ақ эстрадиол (E2) және прогестерон (P4) өндірісімен расталды. ERβ-гранулярлық жасушалардағы аутофагияны индукциялайтын маңызды ядролық рецептор ретінде анықталды, бұл аутофагияға қатысты мРНҚ және белоктардың деңгейлеріне негізделген. Сонымен қатар, ERβ-ның гранулярлық жасушалардағы аутофагиядағы рөлі рапамицин (RAPA) немесе 3-метиладенин (3-MA) өңдеулері кезінде si-ERβ немесе oe-ERβ трансфекциясымен бірге расталды. AKT/mTOR сигналдық жолы мен оның фосфорлану деңгейі бойынша алынған мәліметтер ERβ гранулярлық жасушалардағы аутофагияны AKT/mTOR жолының тежелуі арқылы индукциялайтынын көрсетті. Қорытындылай келе, бұл зерттеу ERβ төмендеуі немесе жоғары экспрессиясының гранулярлық жасушалардың пролиферациясы мен функциясын реттеп, аутофагияны AKT/mTOR сигналдық жолы арқылы индуцирлейтінін көрсетті. Алынған деректер ERβ арқылы аутофагияны реттеудің жаңа механизмін ашып, овари гранулярлық жасушаларындағы аутофагияның рөлі туралы жаңа түсінік берді.